《植物生理学实验》实验3.pptx

小结;

叶绿体色素及其理化性质

叶绿素的定量测定;实验意义;实验原理;类胡萝卜素胡萝卜素橙黄色不溶于水

叶黄素鲜黄色溶于有机溶剂

;与水混溶的有机溶剂：95％乙醇；80％丙酮;二、叶绿素的荧光现象;反射光（荧光）;;三、叶绿素的皂化作用;四、叶绿素与类胡萝卜素的吸收光谱;;类胡萝卜素的吸收光谱;五、氢和铜对叶绿素中镁的取代;;;色素提取;结果

说明现象；

解释原因；

书后思考题。;叶绿素的定量测定

;原理

根据郎伯-比尔定律,有色溶液在某一特定波长下的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比.

D=kCL

k为比例系数。当溶液浓度以重量百分浓度为单位，液层厚度为１cm时，k称为比吸收系数．;;在叶绿素浓度为g/L时

663nm下：Chla80%丙酮k为80.02

Chlb80%丙酮k为9.27

645nm下：Chla80%丙酮k为16.75

Chlb80%丙酮k为45.6

;光密度具有加和性质,因此可写出以下方程

D663=82.04Ca+9.27Cb

D645=16.75Ca+45.6Cb

解方程得：

Ca=12.7D663-2.59D645

Cb=22.9D645-4.67D663

注意：在此式中叶绿素浓度单位为mg/L。

CT=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663;叶绿素a、b在652nm处有相同的比吸收系数(34.5),也可在此波长下测定一次光密度D652，求出叶绿素a、b的总量。

;实验步骤;3.测定：倒入1cm比色杯中,在分光光度计上测定645nm,663nm和652nm下的光密度值.重复测定2次,取平均值.

4.计算：根据上述计算公式计算叶绿素浓度.根据下式计算叶绿素在叶片中的含量:

;四思考题:

叶绿素a、b在蓝光区也有吸收峰，能否用这一吸收峰波长进行叶绿素a、b进行定量分析？为什么？

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