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1.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤?核心步骤是哪一步?
2.什么是目的基因?常用的目的基因有哪些?
3.什么是PCR?进行PCR需要什么条件?
4.PCR大致过程是怎样的?扩增的结果是什么?PCR的产物通常如何鉴定?
5.什么是引物?引物的作用是什么?引物的选择一般需要注意什么?
6.用PCR可以扩增mRNA吗?
7.利用PCR是否成功扩增出DNA片段如何判断?如果扩增不成功,可能是什么原因造成的?进行电泳鉴定的结果如果不止一条条带,可能原因是什么?
1.构建基因表达载体的目的是什么?一个完整的基因表达载体应该包括哪些元件?什么是启动子、终止子?什么是起始密码子?什么是终止密码子?基因表达载体如何构建?
2.将生物的所有DNA直接导入受体细胞不是更简便吗?如果这么做,效果会怎样?
3.什么是转化?转化植物细胞常用方法有哪些?分别适用于什么植物?
4.转化动物细胞一般用什么方法?通常选用什么细胞作为受体细胞?
5.转化微生物细胞一般采用什么方法?如何使大肠杆菌处于感受态?选择大肠杆菌作为受体细胞有何优势?
6.目的基因导入受体细胞后,是否稳定维持和表达其遗传特性,该如何检测与鉴定.;第3章基因工程;;基因工程的应用;转基因抗虫植物;提高动物的生长速率;让转基因哺乳动物批量生产药物;1.对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物;干扰素是人体或动物受到病毒侵染后产生的一种细胞因子,是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白,在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病、乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等。;真核生物的DNA转录形成的RNA需要加工处理成为成熟的mRNA后才能作为下一步翻译的模板,而原核生物不需要。;2、在大肠杆菌中合成的干扰素(糖蛋白)有活性吗?;;2.让转基因哺乳动物批量生产药物;(1)动物乳腺有完整的蛋白质翻译后修饰系统,生产的蛋白质活性高,更稳定。;药用蛋白基因;
比较内容;3.用转基因动物作为器官移植的供体;;2022年1月7日,马里兰大学医学院进行了世界首例活人成功植入基因编辑猪心脏的手术,57岁的心脏病患者大卫·贝内特(DavidBennett)接受了一颗经过基???编辑的猪心脏以挽救生命。
2022年3月8日,大卫·贝内特因病情恶化而不幸去世,这颗猪心脏让他延长了2个月寿命。;1.基因工程菌;——凝乳酶:大多数奶酪的生产需要使用凝乳酶来凝聚固化奶中的蛋白质。;——淀粉酶、脂酶:加工转化糖浆需要的淀粉酶,加工烘烤食品用到的脂酶等也都可以通过构建基因工程菌,然后用发酵技术大量生产。;利用经过基因改造的微生物生产清洁能源;
基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。;毒物诱导型启动子S在毒物诱导下可启动转录。研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S(如图2,图中箭头表示转录方向)插入图1载体的P区,构建表达载体并转入大肠杆菌,获得能够检测水中毒物的大肠杆菌M。回答下列问题:;(3)用Ca2+处理大肠杆菌,便于转入构建好的表达载体。可以使用添加__________的培养基筛选转入载体的菌株。
(4)请写出利用大肠杆菌M检测水体是否被毒物污染的实验思路,并预期实验结果及结论。
实验思路:____________。预期实验结果及结论:____________。;实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是∶在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是()
A.做RT-PCR之前,需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B.RNA不能作为PCR扩增的模板,故需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增
C.若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者没有感染病毒
D.病毒检测还可以检测病毒的物质或病毒引发产生的抗体,其原理都是抗原-抗体杂交;每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数(Ct值),病毒核酸浓度越高,Ct值越_______。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。;4.如图表示科研人员利用乙烯合成酶的反义基因,通过转基因技术获得耐储存的转基因番茄的过程。下列相关叙述错误的是()
;小结;课后作业:;练习与应用;练习与应用;练习与应用;练习与应用;练习与应用
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