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猪SC单克隆抗体制备及鉴定研究

目录

猪SC单克隆抗体制备及鉴定研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1猪源单克隆抗体的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.2猪源抗体制备的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.1猪源抗原．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.2细胞株．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.1.3试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2单克隆抗体制备步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.1抗原免疫与细胞融合．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2.2细胞筛选与克隆化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.2.3单克隆抗体的分泌与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.3鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.3.1抗体特异性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.3.2抗体亲和力测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.3.3抗体纯度与稳定性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

3.1单克隆抗体的制备结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

3.1.1抗体分泌细胞的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.1.2单克隆抗体的产量与活性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2单克隆抗体的鉴定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2.1特异性鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.2.2亲和力分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.2.3纯度与稳定性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

猪SC单克隆抗体制备及鉴定研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

二、研究背景及目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

单克隆抗体技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

猪SC单克隆抗体研究的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

三、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

实验动物与细胞系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

（1）实验动物选择及饲养管理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

（2）细胞系及培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

抗原制备与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

（1）抗原设计与合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

（2）抗原纯度与活性鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

单克隆抗体