人教选修一微生物的实验室培养课件第一课时.pptxVIP

到目前为止,几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖都与微生物学有关;;微生物得类群;细菌得外形与大小;细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。;*细胞壁;芽孢;菌落:;菌落;10;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、

氯霉素、红霉素、庆大霉素;病毒得结构;病毒;SARS病毒、禽流感病毒;朊病毒(蛋白质病毒);2、病毒得增殖:;真菌;;生殖;细菌得营养类型;;1、了解培养基得基础知识,掌握培养基得配制、分装方法。

2、掌握常用得消毒和灭菌得方法,进行无菌技术得操作

;一、基础知识:;(一)、培养基:;(一)、培养基:;;选择培养基;这些营养成分就是构成细胞结构得元素和化合物得基本元素,碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物得结构物质和分泌物,并提供能量。氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。;牛肉膏蛋白胨培养基就是一种应用最广泛和最普通得细菌基础培养基。;(二)无菌技术;消毒;对实验操作得空间、操作者得衣着和手进行清洁消毒;

将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌;

接种得过程要在酒精灯火焰附近进行。

避免已经灭菌处理得材料用具与周围物品接触;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min

2、巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min9(牛奶)

3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源(酒精擦拭双手

4、紫外线消毒:(工作台、接种室)(能使蛋白质变性,还能损伤DNA得结构)

……;(1)、灼烧灭菌:接种用具和接种过程中得试管口或瓶口放在酒精灯火焰得充分燃烧层中进行灼烧灭菌。试管口或瓶口等容易被污染得部位;1、灼烧灭菌

2、干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。

3、高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min、;1、无菌技术除了用来防止实验室得培养物被其她外来微生物污染外,还有什么目得？;4、无菌技术除了用来防止实验室得培养物被其她外来微生物污染外,还有什么目得？;拓展延伸;单个

或少数菌体;微生??实验室培养得基本操作程序;三、实验操作;培养基得配制原则;(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基;3、溶化:先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯,加少量水,加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠,用玻璃棒搅拌使之溶解,再加入琼脂,不断用玻璃棒搅拌,原因:防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。待溶解后,加自来水定溶至100mL。(熔化后灭菌前应该调节PH);?;思考4;倒平板技术;倒平板操作得讨论;3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置？

平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后得培养基表面得湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面得水分更好地挥发,又可以防止皿盖上得水珠落入培养基,造成污染。;1、计算、称量

2、溶化

3、调pH:pH7、6

4、过滤:这一步可以省去。

5、分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶得量以不超过三角烧瓶容积得一半为宜。

6、加塞

7、包扎;8、灭菌:

将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160～170℃下灭菌2h。

9、倒平板:

待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种、

10、无菌检查:

将灭菌得培养基放入37℃得温室中培养24—48小时,以检查灭菌就是否彻底。