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栀子SSR分子标记体系构建及其遗传多样性研究

目录

内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.1栀子属植物资源概况．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.2分子标记技术发展与应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.3本研究的实践价值与理论贡献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.2国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.2.1栀子遗传多样性研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2.2SSR分子标记技术相关研究综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.2.3现有研究的不足与本研究的切入点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

1.3.1主要研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.3.2具体研究内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.4技术路线与研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

1.4.1总体技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

1.4.2主要研究方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.1试验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.1.1供试栀子种质资源来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.1.2株系基本信息与采样方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.2主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.2.1实验试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.2.2实验仪器设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.3DNA提取与检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.3.1植物基因组DNA提取方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.3.2DNA浓度与纯度测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.4SSR引物筛选与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.4.1SSR引物来源与初筛．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.4.2引物反应体系优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.4.3扩增条件确定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.5SSR扩增与电泳检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.5.1PCR扩增反应体系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

2.5.2PCR扩增程序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.5.3PCR产物检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

2.6数据统计分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

栀子SSR分子标记体系的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.1筛选多态性SSR引物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.1.1引物扩增结果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

3.1.2多态