DB22_T1618-2012_饲料中玉米赤霉烯酮的测定液相色谱-质谱_质谱法_吉林省.docxVIP

ICS65.120

B04

DB22

备案号：35746-2013

吉林省

地

方标准

DB22/T1618—2012

饲料中玉米赤霉烯酮的测定

液相色谱-质谱/质谱法

吉林省质量技术监督局

发布

DB22/T1618—2012

前

言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心、长春大成实业有限公司、吉林出入境

检验检疫局。

本标准主要起草人：康明芹、姚天玲、黄军生、梁红锐、杨帆、张勋、顾婷婷、刘友林。

I

DB22/T1618—2012

饲料中玉米赤霉烯酮的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了饲料中玉米赤霉烯酮的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于饲料中玉米赤霉烯酮的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

试样用乙腈-水溶液提取，免疫亲和柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。

4试剂与材料

4.2三水乙酸铅(C4H6O4Pb·3H2O)。

4.6玉米赤霉烯酮标准物质（C18H22O5，CAS号：17924-92-4）：纯度≥98%。

4.725%乙酸铅溶液：称取58g三水乙酸铅（4.2），用142mL水溶解，混匀。

4.8乙腈-水（65+35）：650mL乙腈和350mL水混匀。

4.90.1%甲酸溶液：取1mL甲酸(4.5)，用水稀释并定容至1000mL。

4.10样品定容液：乙腈-0.1%甲酸溶液(75+25)。量取75mL乙腈(4.3)与25mL的0.1%甲酸溶液(4.9)，

混匀。

4.11玉米赤霉烯酮标准储备液：100.0mg/L。准确称取适量玉米赤霉烯酮标准物质（4.6）用甲醇溶解

并全部转移至50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，0℃~4℃可避光保存6个月。

1

DB22/T1618—2012

4.12玉米赤霉烯酮标准工作液：准确吸取玉米赤霉烯酮标准储备液（4.11）1.0mL于100mL容量瓶

中用甲醇稀释成1.0mg/L的溶液，准确吸取上述标准溶液适量于容量瓶中，用甲醇依次配制成浓度为

2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L、200.0μg/L、500.0μg/L的系列标准溶液。

4.13玉米赤霉烯酮免疫亲和柱：60mg/3mL。

4.14纤维滤纸：直径11cm，孔径1.5μm，无荧光特性。

4.15滤膜：0.22μm，有机系。

5仪器与设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。

5.2高速匀浆机。

5.3高速离心机：10000r/min。

5.4超声波清洗器：40kHz。

5.5天平：感量0.0001g和0.01g。

5.6具塞聚丙烯或聚四氟乙烯离心管：50mL。

5.7涡旋混合器。

称取4g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入0.6g氯化钠，20mL乙腈-水溶液(4.8)，涡旋

混合1min，10000r/min均质1min，超声15min后，10000r/min冷冻离心4min，取4mL上清液于另一

离心管中，加入16mL水进行稀释，加入200μL乙酸铅溶液（4.7），涡旋混匀后10000r/min冷冻离心4

min，过纤维滤纸，滤液待净化。

将注射器连接于免疫亲和柱（4.13）上方，准确加入上述滤液10mL，使滤液以不超过1滴/秒的速

度通过免疫亲和柱，直至有部分空气通过柱体。用5mL水淋洗柱子，并使部分空气通过柱体，用1.5mL

以不超过1滴/秒的流速洗脱至玻璃试管中，55℃氮气吹干，用样品定容液（4.10）定容至1mL，过0.22

μm滤膜，待测。

2

DB22/T1618—2012

7.3空白试验

除不称取试样外，均按7.1、7.2进行。

7.4测定

7.4.1色谱参考条件

色谱参考条件如下：

a）色谱柱：C18，2.1mm×150mm，3.5μm；

b）柱温：室温；

c）流速：0.20mL/min；

d）进样量：10μL；

e）流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液（75+25)。

7.4.2质谱参考条件