DB45T 2581-2022 番茄黄化曲叶病毒RT-PCR检测方法.pdfVIP

ICS65.020.01

CCSB16

45

广西壮族自治区地方标准

DB45/T2581—2022

番茄黄化曲叶病毒RT-PCR检测方法

DetectionmethodoftomatoyellowleafcurlvirusbyRT-PCRtechnique

2022-08-25发布2022-09-30实施

广西壮族自治区市场监督管理局发布

DB45/T2581—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出并宣贯。

本文件由广西壮族自治区农业农村厅归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所。

本文件主要起草人：甘桂云、蒋雅琴、李韦柳、康德贤、王益奎、李文嘉、蔡健和、韦福征、黎炎、

吴永官。

I

DB45/T2581—2022

番茄黄化曲叶病毒RT-PCR检测方法

1范围

本文件界定了番茄黄化曲叶病毒RT-PRC检测方法所涉及的术语和定义，规定了番茄黄化曲叶病双生

病毒RT-PCR检测方法的仪器与试剂、采样与样品处理、病毒DNA提取与检测、PCR扩增检测、结果描述及

判定的要求。

本文件适用于广西壮族自治区行政区域内番茄及其近缘属种植株番茄黄化曲叶病毒的检测。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

番茄黄化曲叶病TomatoYellowLeafCurl

番茄黄化曲叶病由番茄黄化曲叶病毒（TomatoYellowLeafCurlVirus）引起，主要症状是植株

生长缓慢，节间缩短，植株明显矮化，叶片变小，顶端叶片发黄并且上卷，整片叶萎缩、褶皱，坐果量

减少，果实变小产生畸形，不能正常转色，果实产量和商品性大幅度降低。

4仪器与试剂

4.1检测仪器

包括但不限于以下内容：

——PCR仪；

——电泳仪；

——凝胶成像系统；

——高速台式冷冻离心机(最高转速15000r/min以上)；

——紫外分光光度计；

——超净工作台；

——冰箱(4℃和-80℃两种)；

——通风橱；

——微量可调移液器(0.5μL～10μL，10μL～100μL，20μL～200μL，200μL～1000μL)；

——配套移液器吸头，Eppendorf离心管(1.5mL)；

——PCR管；

——研钵。

1

DB45/T2581—2022

4.2检测试剂

除特别说明外，下列试剂均为分析纯。如下：

a)DNA提取液：100mmol/LTris-HCl(pH8.0)，20mmol/LEDTA，1.4mol/LNaCl,2％(w/v)CTAB，

4％PVP，40mmol/L巯基乙醇；

b)TE缓冲液：含10mmol/LTris-HCl(pH8.0)，1mmol/LEDTA-Na2(pH8.0)；

c)50×TAE电泳缓冲液：242g