《苹果砧木多倍体育种技术规程》 .docVIP

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FORMTEXT陕西省地方标准

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FORMTEXT苹果砧木多倍体育种技术规程

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前??言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由陕西省果蔬标准化技术委员会提出。

本文件由陕西省农业农村厅归口。

本文件起草单位：西北农林科技大学、洛川县苹果生产技术推广服务中心、洛川县苹果产业研发中心

本文件主要起草人：马锋旺、李超、邹养军、李翠英、魏江彤、屈军涛、李前进、沈文涛、龚小庆、毛柯、刘长海。

本文件由西北农林科技大学负责解释。

本文件首次发布。

联系信息如下：

单位：西北农林科技大学

电话：029地址：陕西省咸阳市杨凌示范区邰城路3号

邮编：712100

苹果砧木多倍体育种技术规程

范围

本文件规定了苹果砧木多倍体的诱导再生、筛选鉴定、区试、抗逆砧木筛选、复试、创制新种质等。

本文件适用于苹果砧木多倍体的育种。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T441苹果生产技术规程

NT/T1085苹果苗木繁殖技术规程

NY/T1318农作物种质资源鉴定技术规程苹果

NY/T2424植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南苹果

NY/T2921苹果种质资源描述规范

NY/T3927农作物品种试验规范果树

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

诱导再生

再生体系

经过离体再生预实验，获得苹果砧木再生培养基配方（配方参见表1）。通过改变不同外植体、培养时间、朝向、培养方式等条件，对苹果砧木的离体再生效率进行探究，建立高效离体再生体系。

增殖培养

外植体形成丛芽后，将大的丛芽切分数个小块，同时将长的小植株切成带1～3个节的小段，插入继代培养基（配方见表1）中增殖。每30d继代一次。培养室温度（25±2）℃，光周期13h，光照强度2000lx。

离体多倍体诱导

将苹果砧木的茎段或叶片接种到诱导培养基（配方参见表1）。通过改变DSMO浓度、秋水仙素浓度、诱导天数，诱导苹果砧木多倍体。

4种培养基配方（根据品种适当修改）

培养基名称

培养基配方

继代培养基

MS+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+0.2mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA

再生培养基

MS+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+6-BA+TDZ+NAA

生根培养基

MS+15g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+0.5mg·L-1IBA+0.5mg·L-1IAA

诱导培养基

MS+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+6-BA+TDZ+NAA+秋水仙素+DMSO

诱导生根

取多倍体砧木2cm茎尖，接入生根培养基（配方参见表1）中，暗培养4d后光照培养，培养条件同4.2，培养10d～15d即可生根。

移栽

生根43d后拧开组培瓶盖子，驯化4d后移栽。土壤加入药水拌成握紧有水溢出状即可装盆，轻轻洗去幼苗根部培养基栽入土壤中，浇定根水，盖上穴盘盖放置于光照培养箱中培养。弱光培养2d后增加光照强度。土壤配比为:基质、珍珠岩、蛭石体积比4:1:1。药水配比为：10L水中添加2g多菌灵，2g吡多灵。光照培养箱弱光值设置为10000lx，强光值设置为14000lx，温度25℃，湿度70%，光周期14h。成活后，移入田间苗圃。

多倍体筛选鉴定

通过气孔观察可用于初选鉴定的多倍体，通过流式细胞仪鉴定筛选。

嫁接

砧木选择

选择1～2年生生长状态良好的二倍体砧木和同源四倍体砧木，且砧木高度需超过60cm。

接穗采集

从采